产品货号:
GS0034
中文名称:
寡聚核苷酸纯化试剂盒
英文名称:
SPIN-10 Column Oligo DNA Purification Kit
产品规格:
50次|100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒使用特殊的吸附膜和结合缓冲液,能够有效地将寡核苷酸片段结合到吸附柱上,特别适用于小片段标记探针的纯化。可去除10个碱基以下的单链DNA片段、酶、盐和没有掺入到单链DNA片段中的放射性、生物素、地高辛标记的单核苷酸。该试剂盒对于15nt(bp)~1000nt(bp)单链或者双链DNA片段,回收效率可达75%。所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学实验。
- 适用范围广,回收效率高,对于15nt(bp)~1000nt(bp)之间的DNA片段回收效率在75%以上。
- 操作简单快速,整个回收过程可在20分钟左右完成。
- 无需酚抽提,无需乙醇沉淀
组分 | 50次 | 100次 |
Binding Buffer I | 36mL | 72mL |
Wash Solution | 12mL | 24mL |
Elution Buffer | 5mL | 10mL |
吸附柱及收集管 | 50套 | 100套 |
保存:室温(18~25℃),有效期见包装,长期存放请置于2~8℃。
- Binding Buffer I中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
- 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段。
- Elution Buffer的洗脱量应根据回收前DNA的量来决定:
如回收前DNA在1~5μg左右,可加20~50μL Elution Buffer;
如回收前有5~20μg左右DNA,可加30~100μL洗脱缓冲液。 - 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
- 自备试剂:无水乙醇等。
- 按瓶身标签说明在Wash Solution中加入4倍体积的无水乙醇,混匀后在瓶身做好标记。于室温密封保存。
- 提前将水浴锅调至60℃备用。
- 将含有DNA片段的溶液用TE Buffer调整体积到50~100μL,加入10倍体积的Binding Buffer I混匀。
- 若对含有放射性标记的寡核苷酸片段进行纯化,请将被放射性沾染的Binding Buffer I,Wash Solution,纯化套件,枪头,离心管等做特殊处理,以免污染环境。
- 将混合液转移到吸附柱中,室温放置2min,8000rpm离心2min。倒掉收集管中的液体,将吸附柱放入同一个收集管中。
- 向吸附柱中加入500μL Wash Solution,10000rpm离心1min。
- Wash Solution首次使用前请检查溶液是否已加入正确量的无水乙醇。
- 重复步骤3一次。
- 倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入同一个收集管中,10000rpm离心2min。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 将吸附柱放入干净的1.5mL离心管中,在吸附膜中央加30~50μL Elution Buffer,室温静置5min,12000rpm离心1min。将所得到的DNA溶液置于-20℃保存或用于后续试验。
- Elution Buffer为2.5mM Tris-HCl,pH8.5,可以用TE或水(pH>7.0)代替。
- 将Elution Buffer预热至60℃可以进一步提高得率。
- 请勿使用小于30μL的洗脱液进行洗脱。
- Elution Buffer为2.5mM Tris-HCl,pH8.5,可以用TE或水(pH>7.0)代替。
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